通常情况下一千公里在高速网上超过24小时，或在某段高速上超过12小时就算是超时，当然一般1000公里路程中往往包含了多段高速路，即便是一些超长的高速道路也会有不一样的计费模式，因此在正常行驶的情况下一般不会被要求加收超时费。
由于不同地区对于高速超时的定义会有所不同，具体要以当地时间为为准，下面是不同省市的高速超时定义标准：
1、上海：根据相关规定，车辆驶入上海高速路网的时间不得超过12小时；
2、河北：车辆驶入路网的时间不得超过24小时，驶入某一路段的时间不得超过12小时；
3、重庆：车辆驶入高速公路的时间不得超过合理时间，一般合理时间是以出入高速路口之间的里程除以最低限速（60km/h）计算为准；
4、安徽：车辆在高速公路行驶的时间不得超过48小时；
5、广西：车辆在入口收费处领取通行卡，到出口收费处的时间不得超过24小时。
综上所述，高速超时的标准根据各个地区的实际情况而有所不同，有12小时、24小时、48小时、60km/h，甚至有些地区还没有设置高速超时费（如广东、山东等），所以一千公里在高速上多久算超时要视具体情况而定。
高速开1000公里要休息几次？
据交通法《道路交通安全法实施条例》规定可知：连续驾驶机动车超过4小时应当停车休息，且休息时间不得少于20分钟，我们以国内高速公路最高限速120km/h为例，驾驶1000公里路程需要8个小时以上的时间，也就相当于在车速为120km/h，高速开1000公里要休息2次。
当然高速开1000公里具体要休息几次还是需要根据情况来看，只不过驾驶时间最长不能超过4个小时，另外如果在行驶过程中感觉到累了困了，那么就应当停车休息，即使只是开了1小时也应该停车休息，以免因疲劳驾驶而造成不可逆的意外。
